压力蒸汽灭菌效果评价方法与标准

压力蒸汽灭菌效果评价方法与标准

1、主题内容与适用范围

 本方法规定了压力蒸汽灭菌技术标准及其评价灭菌效果的检测方法。

 本方法适用于对压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的评价。

2 、试剂

 本标准所用试剂，凡未说明规格者，均为分析纯（AR)，水为蒸馏水。

2.1 蛋白陈。

2.2 葡萄糖。

2.3 嗅甲酚紫酒精溶液：取澳甲酚紫2.0g，溶于100mL95％乙醇中。

2.4 澳甲酚紫蛋白陈水培养基配制：蛋白脏 10. 0g,葡萄糖 5. 0g，溶于 1000mL蒸馏水中，调 pH值至7. 0-7. 2，然后再加 2%澳甲酚紫酒精溶液 0. 6mL，摇匀后，按 5mL／管，分装包口，置压力蒸汽灭菌器中，于 115 C灭菌 40min后备用。

3、指示菌

 嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC 7953或 SSI K31）菌片，含菌量为5 X 10'-5X 106 cfu／片，121 C下，杀灭90％微生物所需时间 D12，值为 1. 3-1. 9min，杀灭时间（KT值）为夏19min，存活时间（ST值）为）3. 9min。

4、化学指示剂

 需用卫生部批准的化学指示剂。

5、技术要求

6、检测方法

6.1 生物学指标（用作压力蒸汽灭菌设备灭菌效果的依据）。

6.1.1 将嗜热脂肪杆菌芽胞菌片两个分别放入灭菌小纸袋 内，置于标准试验包中心部位。

6.1.2 灭菌柜室内，上、中层中央和排气口处各放置一个标准试验包（由 3件平纹长袖手术衣，4块小手术巾，2块中手术巾，1块大手术巾，30块 10cm X 10cm, 8层纱布敷料包裹成 25cm X 30cm X 30cm大小）。手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒（22cm X 13cm X 6cm）代替标准试验包，盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位两只灭菌试管内（试管口用灭菌牛皮纸包封），将盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。

6.1.3 经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片，投入澳甲酚紫葡萄糖蛋白陈水培养基中，56℃培养 48h，观察培养基颜色变化。

6.2 化学指标

在物品包外用化学指示胶带 ，可作为物品是否经过灭菌的处理标志。在物品包 内中心部位用化学指示剂，可作为物品是否灭菌的参考标志。

7、结果判定及评价

7.1 同次检测中，标准试验包或通气贮物盒内，每个指示菌片接种的澳甲酚紫蛋白陈水培养基全部不变色，判定为灭菌合格。指示菌片之一接种的澳甲酚紫蛋白陈水培养基由紫色变为黄色时，判定为灭菌不合格。

7.2 化学指示剂的颜色变为与灭菌合格标准色相同时，或熔化时作为灭菌合格的参考标准。